超濾離心管具有快速超濾功能，能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù)，輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理，并達(dá)到30倍的濃縮。
超濾離心管的使用方法：
1、將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。
2、向超濾管內(nèi)管中加入不超過(guò)500μL的樣本，并蓋上蓋子。
3、將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中，讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間，用一個(gè)類似的超濾管平衡。
4、離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出，取出內(nèi)管。
5、為了回收濃縮后的溶質(zhì)，將內(nèi)管倒過(guò)來(lái)插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中，讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間，用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡，超濾液可以保存在收集管中。
注意，當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí)，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍(lán)色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要準(zhǔn)確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測(cè)，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時(shí)超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
